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首頁-新聞資訊-使用分光光度計的步驟與方法

使用分光光度計的步驟與方法

  • 更新時間2017-07-13
  • 點擊次數(shù)3603
   分光光度計是將成分復雜的光,分解為光譜線的科學儀器。測量范圍一般包括波長范圍為380~780 nm的可見光區(qū)和波長范圍為200~380 nm的紫外光區(qū)。不同的光源都有其*的發(fā)射光譜,因此可采用不同的發(fā)光體作為儀器的光源。鎢燈的發(fā)射光譜:鎢燈光源所發(fā)出的380~780nm波長的光譜光通過三棱鏡折射后,可得到由紅、橙、黃、綠、藍、靛、紫組成的連續(xù)色譜;該色譜可作為可見光分光光度計的光源。
  使用分光光度計的步驟與方法:
  1.預熱儀器:
  為使測定穩(wěn)定,將電源開關打開,使儀器預熱20min,為了防止光電管疲勞,不要連續(xù)光照。預熱儀器時和在不測定時應將比色皿暗箱蓋打開,使光路切斷。
  2.選定波長:
  根據(jù)實驗要求,轉動波長調節(jié)器,使指針指示所需要的單色光波長。
  3.固定靈敏度檔:
  根據(jù)有色溶液對光的吸收情況,為使吸光度讀數(shù)為0.2~0.7,選擇合適的靈敏度。為此,旋動靈敏度檔,使其固定于某一檔,在實驗過程中不再變動。一般測量固定在“1”檔。
  4.調節(jié)“0”點:
  輕輕旋動調“0”電位器,使讀數(shù)表頭指針恰好位于透光度為“0”處(此時,比色皿暗箱蓋是打開的,光路被切斷,光電管不受光照)。
  5.調節(jié)T=100%:
  將盛蒸餾水(或空白溶液或純溶劑)的比色皿放入比色皿座架中的*格內,有色溶液放在其它格內,把比色皿暗箱蓋子輕輕蓋上,轉動光量調節(jié)器,使透光度T=100%,即,表頭指針恰好指在T=100%處。
  6.測定:
  輕輕拉動比色皿座架拉桿,使有色溶液進入光路,此時表頭指針所示為該有色溶液的吸光度A,讀數(shù)后,打開比色皿暗箱蓋。
  7.關機:
  實驗完畢,切斷電源,將比色皿取出洗凈,并將比色皿座架及暗箱用軟紙擦凈。
  分光光度計已經(jīng)成為現(xiàn)代分子生物實驗室常規(guī)儀器。常用于核酸,蛋白定量以及細菌生長濃度的定量,應用的領域也日漸廣泛。

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